泡沫灭火剂水生生物急性毒性试验方法 XF/T3021-2023
5 试验准备
5.1 仪器设备及材料
仪器设备至少应包括：
a）溶解氧测定仪；
b）温度控制仪；
c）发光细菌毒性测定仪；
d）电子天平；
e）涡旋混合器；
f）化学惰性材料制成的水槽或烧杯，规格应一致，体积适宜；
g） pH计；
h）容量瓶（100mL、500mL、1000mL）；
i）移液器（50μL、1mL、5mL）；
j）2L烧杯；
k）2.5mL玻璃管；
l）三级水（符合GB／T 6682要求）。
5.2 样品的采集和处理
5.2.1 样品采集
泡沫灭火剂样品在取样时应注意取样的均匀性。取样前应颠倒、晃动容器，使样品混合均匀后取样，如容器不便移动，可在容器内高、中、低三个不同位置取样混合后作为试验样品。
取样时所用的容器应仔细清洗干净，用三级水润洗并彻底烘干。样品应盛装到玻璃瓶或塑料瓶中，静置，待产生的泡沫消失后进行试验。
5.2.2 样品处理
用电子天平称取一定质量的泡沫灭火剂样品，加入定量三级水，用玻璃棒缓慢搅拌均匀，避免搅拌过程中表面出现大量气泡，再转移到500mL容量瓶中，用三级水定容，混合均匀，静置后用作待测的储备溶液。
5.3 试验生物
5.3.1 斑马鱼
试验鱼种应是斑马担尼鱼，平均体长3.0cm±0.5cm，体重0.3g±0.1g，应选自同一驯养池中规格大小一致的幼鱼。试验用鱼在试验前应在23℃±1℃环境下饲养7d以上，每天投喂饵料，并及时清除粪便和食物残渣，饲养期内斑马鱼的死亡率小于5％。试验前24h停止喂食，试验期间也不喂食。挑选体型大小一致且身体健康的斑马鱼用于急性毒性试验。
5.3.2 发光细菌
发光细菌选用青海弧菌Q67或其他能满足试验要求的淡水型发光细菌菌种。商业化的发光细菌菌种为一次性安瓿瓶包装冻干粉，在-18℃条件下保存。按7.3.1将冻干粉复苏后5min即可恢复发光，在暗室中肉眼应可见其发出的绿光，经适当稀释后，可用于检测。
5.4 参比物质
为验证方法的有效性，分别选用分析纯重铬酸钾（K2Cr2O2）和苯酚（C6H5OH）作为斑马鱼急性毒性试验和发光细菌急性毒性试验的参比物质。
重铬酸钾储备液：用分析天平称取1g重铬酸钾，加入三级水溶解，转移到100mL容量瓶中，定容。
苯酚储备液：用分析天平称取100mg苯酚，加入三级水溶解，转移到100mL容量瓶中，定容。
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