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附录I（规范性附录）氨气浓度测定方法

I.1 测定条件

在实验动物设施处于正常生产或实验工作状态下进行，垫料更换符合时限要求。

I.2 测定原理

实验动物设施环境中氨浓度检测应用纳氏试剂比色法进行。其原理是：氨与纳氏试剂在碱性条件下作用产生黄色，比色定量。

此法检测灵敏度为2μg/10mL。

I.3 检测仪器

I.3.1 检测仪器为大型气泡吸收管，空气采样机，流量计0.2L/min～1.0L/min，具塞比色管（10mL），分光光度计。基于纳氏试剂比色法的现场氨测定仪。

I.3.2 检测仪器应在有效检定期内。

I.4 样品采集

I.4.1 试剂

吸收液：0.05 mol/L硫酸溶液。

纳氏试剂：称取17g氯化汞溶于300mL蒸馏水中，另将35g碘化钾溶于100mL蒸馏水中，将氯化汞溶液滴入碘化钾溶液直至形成红色不溶物沉淀出现为止。然后加入600mL20％氢氧化钠溶液及剩余的氯化汞溶液。将试剂贮存于另一个棕色瓶内，放置暗处数日。取出上清液放于另一个棕色瓶内，塞好橡皮塞备用。

标准溶液：称取3.879g硫酸铵［（NH₄）₂SO₄］（80℃干燥1h），用少量吸收液溶解，移入1000mL容量瓶中，用吸收液稀释至刻度，此溶液1mL含1mg氨（NH₃）贮备液。

量取贮备液20mL移入1000mL容量瓶，用吸收液稀释至刻度，配成1mL含0.02mg氨（NH₃）的标准溶液备用。

I.4.2 样品采集方法

应用装有5mL吸收液的大型气泡吸收管安装在空气采样器上，以0.5L/min速度在笼具中央位置抽取5L被检气体样品。

I.5 分析步骤

采样结束后，从采样管中取1mL样品溶液，置于试管中，加4mL吸收液，同时按表I.1配制标准色列，分别测定各管的吸光度，绘制标准曲线。

向样品管中加入0.5mL纳氏试剂，混匀，放置5min后用分光光度计在500nm处比色，读取吸光度值，从标准曲线表中查出相对应的氨含量。

I.6 计算

I.6.1 将采样体积按式（I.1）换算成标准状态下采样体积

式中：

V₀——标准状态下的采样体积，单位为升（L）；

V_t——采样体积，单位为升（L）；

t——采样点的气温，单位为摄氏度（℃）；

t₀——标准状态下的绝对温度273K；

P——采样点的大气压，单位为千帕（kPa）；

P₀——标准状态下的大气压，101 kPa。

I.6.2 空气中氨浓度，式（I.2）：

式中：

X——空气中氨浓度，单位为毫克每立方米（mg/m³）；

C——样品溶液中氨含量，单位为微克（μg）；

V₀——换算成标准状况下的采样体积，单位为升（L）。

I.7 注意事项

当氨含量较高时，则形成棕红色沉淀，需另取样品，增加稀释倍数，重新分析；甲醛和硫化氢对测定有干扰；所有试剂均需用无氨水配制。

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实验动物环境及设施 GB14925-2010

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